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浮游菌采樣器的采樣和培養

點擊次數:621  更新時間:2023-08-03
   1、工作原理
  微生物采樣器利用安德森采樣器,在一定的流量條件下對空氣中懸浮的微生物顆粒進行采樣,通過改變孔徑的方法將不同粒徑的顆粒物進行六級分離,達到對一定體積的氣體中所有生物活性顆粒物采集的目的。安德森原理中沒有指明每一級分別采什么菌,但卻給出了每一級所能捕獲的顆粒的粒徑范圍。一般情況下,空氣流入采樣器的橫截面積是固定的,流量與流速是成線性正比的關系。依據安德森原理,空氣中的顆粒進入采樣器,只有流速乘以顆粒的質量值足夠大,大于培養基表面氣墊阻力乘以受阻時間值時,該微生物顆粒才能吸附在培養基上,否則被風機抽走并排出采樣器。
  所以撞擊頭的設計就成為了關鍵,這個孔開大開小,長條形還是圓形甚至五角形都是可以的,孔洞式與狹縫式除了現狀上的區別,理論上沒有其他區別,但是他們都必須要通過第三方的實驗室驗證捕獲率,通常捕獲率在90%-110%之間,都算合格的。
  2、工作過程
 ?。?)在有平臺的潔凈室內編制培養皿(XX潔凈室,XX測點),操作前應用浸濕75%乙醇的醫用脫脂棉花擦拭平臺。測試人員雙手用同樣方法嚴格消毒。在編制過程中再次仔細檢查培養基平皿的質量,有變質、破損或污染不能使用。
 ?。?)用浸濕75%乙醇的醫用脫脂棉花擦拭采樣器的采樣口,采樣管、采樣器的項蓋,轉盤及罩子內外表面。
 ?。?)采樣器經消毒后不放入培養皿,啟動儀器空轉運行不少于5 min,使儀器中的殘余消毒劑蒸發。
 ?。?)根據被測地點的潔凈度設定采樣量,采樣器的流量(L/min)X采樣時間(min)=采樣量(L)。
 ?。?)采樣操作時,培養皿應輕拿輕放,用“五指抓拿”培養皿外徑,盡量避免人為對樣本造成污染。
 ?。?)根據被測地點的面積確定采樣點的布置及采樣點數量。
  3、浮游菌采樣器的使用注意事項
 ?。?)采樣器應該充分清潔滅菌。如果清潔滅菌不充分,浮游細菌采樣器上的細菌脫落飛揚,就有可能增加采到的細菌數量,測定結果可能出現巨大的誤差。
  常用的滅菌方法有兩種,(1)使用75%乙醇對一臺采樣器每一級撞擊板的表面和背面,以及撞擊板周邊密封圈和進氣口等部位進行擦拭消毒。
 ?。?)使用高壓蒸汽滅菌采樣器取下密封圈,每一級獨立包裝后使用壓
  力蒸汽滅菌器在102.9Kpa,121℃條件下高壓滅菌30min。
 ?。?)正確調節噴射距離。氣體噴射器狹縫到培養基的距離關系到細菌撞擊培養基的力度。距離較近,撞擊培養基的力度較大;距離較遠,撞擊培養基的力度較小。采樣前應將噴射距離調節到標準量值。
 ?。?)將流量調節到標準量值。氣體的流量關系到氣體的噴射速度。速度過大則撞擊的力度也大,速度過小則撞擊的力度也小,所以采樣前應將流量調節到標準量值。由于采樣頭的多孔結果尺寸固定,如果采樣器流量達不到設定值,則撞擊速度將發生偏離,采集到浮游菌就有偏差。因此,采樣流量是浮游菌采樣器的重要指標。一般采用流量計對浮游菌采樣器的泵體流量進行校準測試。
 ?。?)根據細菌濃度選取采樣時間。采入培養皿中的細菌數決定培養皿中細菌的密度。密度過小,統計到的細菌個數較少,統計誤差較大;密度過大,容易相互重疊,產生漏計誤差。所以培養皿中細菌的密度應適中。在氣體中細菌的濃度固定、氣體的流量固定的情況下,采樣的時間越長,培養皿中細菌的密度越大;采樣的時間越短,培養皿中細菌的密度越小。
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